所使用相機主要參數:sCMOS四百萬像素,2048x2048,pixel6.5um,成像有效面積13.3x13.3mm,幀率30fps,極限幀率100fps(搭配PCIe),量子效率82%@560nm。
水平方向20nm,垂直(z)方向50nm,三通道每個區域像素:738x345,每個通道視野范圍:48x22um,垂直(z)方向成像范圍1000nm。
力顯智能科技的iSTORM超高顯微鏡可實現3通道同時成像,分別是561、656、750三個通道,每通道激光照明功率不低于150mW,可實現0~100%調節。
力顯智能科技的iSTORM超高顯微鏡系統包含以下模塊:顯微鏡主體、三色成像系統、TIRF系統、激光和控制器系統、成像工作站。
可以的,可以使用商用顯微鏡的鎖焦系統,z方向鎖焦精度在20-50nm;使用力顯三維鎖定系統,z方向鎖定精度可以達到5nm。
算法經過優化后,iSTORM超高圖像可以實現實時重構,立等可得。
使用物理鎖定的方式,實時追蹤樣品上的一個基準點的位置,并根據此移動樣品位置,補償樣品漂移。因為基準點可以在樣品制備之前加入,并且在成像過程中亮度保持穩定,所以不會增加樣品制備的復雜性,可以在整個成像過程中保持樣品位置穩定在1nm左右。
根據樣品及結構的不同,成像時間也不同。結構比較復雜的固定細胞可能要幾分鐘到十幾分鐘,活細胞成像最快可以幾秒鐘完成。
使用配置中的緩沖液和染料及照明光配合,可以使樣品上標記的熒光染料“閃爍”,使得原始圖像上可以獲得單分子的熒光染料圖像,之后通過單分子定位原理,對每個亮點進行位置擬合,并記錄在超高成像結果中。單個熒光點的定位精度與拍攝中獲得的熒光點光子數目有關系,一般情況下可以將分辨率提升10倍。
可以先用寬場成像,對樣品整體進行快速掃描,找到目標細胞后進行超高成像。
針對固定的細胞我們有專用的雙通道和三通道成像緩沖液試劑盒,進行單獨售賣。
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