iSTORM 可以實現單分子定位于計數，通過定位與計數可以實現對亞細胞結構以及大分子復合

物結構的解析以及生物動力學的分析。iSTORM 也整合了 SPT 的功能，具體的應用可以參考我們的產品手冊

STORM 的原理實質是通過時間換空間的方式實現了對衍射極限的突破，時間分辨率相對不高。通常情況下做活細胞超高不容易，但我們力顯智能的 iSTORM 已經實現了活細胞的超高拍攝。

另外，我們的系統還可以實現單顆粒追蹤（Single Particle Tracking, SPT）。在分子密度不高的情況下，可以實現單個分子或者納米尺度顆粒在活細胞內的追蹤。可用于分子生物學機制、生物學過程的研究以及藥物篩選。

iSTORM 使用的染料需要在緩沖液的配合下具有光切換的性質，例如熒光染料 Alexa 系列中的幾種，Atto 系列中的幾種；特定的熒光蛋白；量子點；或者其他經過處理、測試后具有光切換性質的染料等；

共聚焦實驗中使用的染料需要具有穩定發光、不易光漂白、亮度高的性質；

因而適用于 STORM 和共聚焦的染料各有不同；

力顯在此領域有豐富的技術經驗，使用力顯的整體解決方案，可以快速、高成功率的獲得實驗

結果。

跟共聚焦比簡單來說：兩點我們不能做 1.不能層掃 2.不能活細胞長時間連續拍攝，其它共聚

焦能做的我們都能做。

iSTORM 可以提供比共聚焦高 10 倍的空間分辨率，可以提供樣品內單分子的定位、計數、軌

跡追蹤等信息；

iSTORM 的成像速度比共聚焦慢，但是目前力顯的活細胞 STORM 成像可以做到幾秒鐘完成一

張超高圖片的拍攝，同時正在研發的基于深度學習的空間分辨率提升技術可以將成像時間進一步縮短，有望達到共聚焦的水平；

iSTORM 的樣品制作需要一些經驗，使用的染料需要在緩沖液的配合下具有光切換的性質，并

且需要與硬件拍攝、數據處理進行配合，從而得到超分辨率圖像，因而使用上有一些門檻，但是力顯在此領域有豐富的技術經驗，使用力顯的整體解決方案，可以快速、高成功率的獲得實驗結果。

超高是指突破了衍射極限的光學顯微成像系統。由于光存在衍射極限，無論顯微鏡做的如何精

密，一般在 xy 平面 200nm 以下的結構就看不清了。

我們的超高分辨率顯微鏡采用的是隨機光學重構的原理，利用熒光染料在激光的作用下可以出現亮暗態切換的特性，在某個時間點，一個熒光分子衍射尺度內其他分子都是暗的時候，拍照可以把它記錄下來。這些分子的光斑符合高斯分布，通過高斯擬合可以把中心點識別出來。下一個時間點拍照可能是其他分子被記錄下來。由于這些染料的閃爍是隨機不同步的。重復這一過程成千上萬次，就可以把所有的熒光染料記錄下來中心點識別出來。利用這些中心點進行重構就得到了突破衍射極限的圖像。這就是隨機光學重構（STORM）超高的分辨率顯微鏡的原理。

共聚焦可分為激光掃描共聚焦以及轉盤共聚焦，都是只采集聚焦平面的光來提升信噪比。僅靠這種方式不能提升空間分辨率，突破不了衍射極限。有些共聚焦結合了反卷積技術，可以提升一倍左右的分辨率，達到 100 多納米，有廠家也把這類共聚焦宣傳為超分辨共聚焦。這個經典意義的超高分辨率顯微成像是有差異的。

技術無法對比，需要根據具體應用場景具體分析，STORM空間分辨率高，SIM時間分辨率高。

具體損傷不好量化，但iSTORM可以進行活細胞成像.

抗體 病毒 核糖體。

扁平細胞更適合，但是不絕對，厚的細胞或者組織切片也可以拍超高。

（1）照明鎖定系統的照明部分：使用功率1w，波長455nm的科勒照明系統，明場照明波段與熒光照明波長和成像波段不重合；

（2）照明鎖定系統的玻片部分：使用融化在玻片上的塑料小球，保證和樣品之間沒有相對移動；

（3）照明鎖定系統的鎖定部分：采用PI壓電陶瓷平臺，精度1nm，位移范圍200um，實現精確校正樣本漂移量。

iSTORM超高TIRF系統是將波長為561nm、647nm、750nm的激光光纖接入TIRF模塊，通過步進電機驅動器調節激光位置，實現激光照明光路Epi、HILO和Tir三種照明，在Tir處精調驅動器找到最佳成像位置。